La diagnosi molecolare corrisponde ad un insieme di tecniche molecolari che mirano ad identificare i cambiamenti nel DNA che possono essere indicativi di malattie genetiche o di cancro, per esempio. Inoltre, le tecniche molecolari sono ampiamente utilizzate per l'identificazione e la conferma delle malattie infettive, poiché rappresentano un metodo diagnostico più rapido e accurato.
La diagnosi molecolare è costosa e quindi non molto richiesta dai medici, tuttavia, fornisce risultati precisi sulla presenza dell'alterazione, sul modo in cui può interferire nel funzionamento dell'organismo e sulla risposta del paziente alla malattia. trattamento.
A cosa serve
La diagnosi molecolare può essere eseguita con diversi obiettivi, i principali sono:
- Identificazione di mutazioni correlate alla leucemia, come l'identificazione della traslocazione di BCR-ABL, che è caratteristica della leucemia mieloide cronica (LMC);
- Le mutazioni caratteristiche delle malattie ematologiche, come l'emocromatosi ereditaria, la policitemia vera, la trombocitemia essenziale e le trombofilie, ad esempio, comprendono cos'è la trombofilia e come viene condotta la terapia;
- Cambiamenti molecolari che indicano l'insorgenza di cancro, come il cancro del colon-retto, del polmone, della mammella e del cervello, per esempio;
- Diagnosi di malattie infettive quali epatite, uretrite, toxoplasmosi, leishmaniosi, ecc., Oltre all'identificazione del virus HPV .
La diagnosi molecolare, nonostante sia considerata costosa rispetto ad altre tecniche diagnostiche, è più accurata, poiché è in grado di informare l'alterazione relativa a una certa malattia e il grado di influenza di questa alterazione nell'organismo, favorendo così il trattamento della persona.
Oltre a essere utilizzati per la diagnosi di varie malattie, anche le tecniche molecolari sono utilizzate per valutare la risposta al trattamento, specialmente nelle persone con cancro, essendo uno dei metodi più efficaci per indicare l'evoluzione della malattia e la ricaduta.
Come è fatto
La diagnosi molecolare può essere eseguita con qualsiasi campione e al medico viene chiesto di fornire informazioni sulle condizioni del paziente, che possono essere l'urina, la saliva o, il più delle volte, il sangue. Non è necessario digiunare o altri preparativi per l'esame.
Il campione viene raccolto e inviato al laboratorio insieme al parere del medico che informa l'esame o il tipo di ricerca che dovrebbe essere fatto. La tecnica molecolare eseguita dipende dall'esame richiesto e comporta una serie di procedure precise il cui scopo ultimo è identificare la presenza o l'assenza di alterazione richiesta dal medico.
Di solito viene utilizzata solo una piccola quantità di campione, il resto viene memorizzato in modo che, se necessario, il test venga ripetuto.
Vedi quali sono le principali tecniche molecolari
PCR
La PCR, acronimo di Polymerase Chain Reaction, è una tecnica molecolare che consiste nell'amplificare un frammento del materiale genetico, sia esso DNA o RNA, con l'obiettivo di identificare le mutazioni e, quindi, di assistere nella diagnosi delle malattie.
Questa tecnica è fatta dall'estrazione e dalla purificazione del materiale genetico, che viene quindi posto in una miscela in cui uno dei componenti è un enzima di restrizione che varia in base all'esame richiesto e la cui funzione è quella di tagliare il materiale in frammenti identificare un possibile cambiamento genetico. Il mix è posto in un termociclatore, che è un apparato che agisce attraverso la variazione di temperatura indicata dal professionista in base all'esame e, in questo modo, consente l'amplificazione del frammento genetico. Nel caso della PCR convenzionale, dopo l'amplificazione, il prodotto della PCR è sottoposto a elettroforesi, che è una tecnica molecolare basata sul peso e sulla dimensione dei frammenti, cioè in base a queste caratteristiche viene generato un modello di bande, l'analisi delle quali viene eseguita basato sulla banda del controllo positivo, cioè nella banda che è nota per corrispondere all'alterazione genetica.
La PCR in tempo reale, chiamata anche qPCR, è un tipo di PCR quantitativa, cioè oltre a identificare l'alterazione genetica, è in grado di fornire informazioni sull'espressione genica, cioè quanto il gene alterato viene espresso nell'organismo e può quindi essere usato per aiutare la diagnosi e monitorare il trattamento. La PCR in tempo reale non richiede l'elettroforesi, l'intero processo di amplificazione e analisi del materiale genetico viene eseguito da un apparecchio e il risultato è interpretato da un professionista sanitario qualificato.
sequenziamento
Il sequenziamento è una tecnica molecolare che consiste nel determinare la sequenza nucleotidica del DNA. Il sequenziamento avviene da una reazione simile alla PCR, tuttavia, nella miscela di amplificazione, vengono aggiunti nucleotidi modificati dall'aggiunta di fluorocromi, che quando il materiale viene amplificato, i nucleotidi modificati vengono incorporati nel DNA e generano diversi frammenti, che corrisponde al prodotto del sequenziamento.
Il prodotto di reazione è posto in un apparato chiamato sequenziatore di DNA, in cui quando i frammenti vengono colpiti dal laser dell'apparato, i fluorocromi vengono eccitati, emettendo fluorescenza, che è indicata dall'apparecchio mediante picchi, ciascun picco corrispondente a un nucleotide. Alla fine della reazione l'attrezzatura informerà la sequenza del DNA, aiutando così il medico nella diagnosi delle malattie genetiche.
